Микроскопические исследования микроорганизмов
С помощью современного биологического микроскопа можно получить увеличение в 2000…25 000 раз и легко установить ряд морфологических особенностей объекта и идентифицировать микроорганизмы.
Наименьшее расстояние, при котором две соседние точки видны под микроскопом раздельно, называют его разрешающей способностью. Чем больше разрешающая способность, тем большее увеличение можно получить под микроскопом.
Увеличение разрешающей способности достигается двумя путями:
1) использованием объектов с большой численной апертурой, которая выгравирована на каждом объективе. Наибольшую численную апертуру имеют иммерсионные объективы, с помощью которых наиболее часто приводят исследования морфологии бактерий;
2) уменьшением длины волны света, которым освещается аппарат. С этой целью исследования проводят в ультрафиолетовом свете, длина волны которой меньше, чем в видимом свете. Для этого имеются специальные УФ-микроскопы. Наименьшие частицы, которые можно хорошо рассмотреть под микроскопом, должны по своим размерам быть больше 1/3 длины волны света. Это означает, что под обычным световым микроскопом можно рассмотреть организмы с размерами не менее 0,2…0,3 мкм.
Наиболее важной частью микроскопа, определяющей его оптическую мощность, являются объективы. Объективы подразделяются на сухие и иммерсионные (маслянопогружные). Сухие объективы (8´, 40´) применяют при небольших увеличениях (400-600 раз). Между объективом и препаратом находится слой воздуха. В силу различных показателей преломления света, препарата и слоя воздуха часть световых лучей отклоняется и не попадает в глаз наблюдателя.
При изучении микроорганизмов почти постоянно пользуются иммерсионным объективом (90´), дающим увеличение в 900-1350 раз. Такой объектив погружают в каплю кедрового масла, нанесенную на препарат. Показатель преломления кедрового масла близок к показателю преломления стекла и между стеклом и линзой объектива устанавливается однородная среда. Благодаря этому все лучи, не преломляясь и не меняя своего направления, попадают в объектив и обеспечивают хорошую видимость объекта.